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分析超速離心技術(shù)的發(fā)展及其應(yīng)用

2009-06-08 [2567]

1926年瑞典物理化學(xué)家T.Svedberg制造出世界上*臺分析超速離心機(jī),zui大轉(zhuǎn)速高達(dá)45000r/min。1929年Lamm推導(dǎo)出了沉降方程。20世紀(jì)50年代是超速離心技術(shù)作為生物化學(xué)研究工具大變革的年代,正如J.T.Edsall(1959)所言,“還沒有一項(xiàng)技術(shù)能勝過超速離心對生物大分子的基本物理化學(xué)研究”。70年代更是超速離心機(jī)及其應(yīng)用大發(fā)展的時代。運(yùn)用超速離心機(jī)對顆粒的沉降分析可獲得諸如分子量、密度、分子形狀等參數(shù),而研究這些參數(shù)在過程中的變化,可作為分離純化樣品混合物組成成分的基礎(chǔ)(D.Freifelder,1976)。

        由于理論的進(jìn)展、儀器的不斷改進(jìn)(包括像離心分析池、光學(xué)系統(tǒng)、溫度和旋轉(zhuǎn)速度的控制等),特別是電腦的應(yīng)用,現(xiàn)在我們可以在比較短的時間內(nèi)準(zhǔn)確地測出一混合物樣品各組分的分子量、測定大分子的沉降系數(shù)和擴(kuò)散系數(shù)等。由于有可靠的理論基礎(chǔ),樣品濃度對分子量測定的影響已經(jīng)可以仔細(xì)地分析,在純化蛋白質(zhì)過程中,氨基酸分子的丟失也能用分析超速離心的方法查出來。對于像核酸等在紫外線范圍內(nèi)有很大吸光度的物質(zhì),它們的沉降行為很容易采用吸收光技術(shù)進(jìn)行研究,甚至在濃度0.001%的系統(tǒng)中。

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